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快速组织免疫荧光染色试剂盒
发布时间:2014-09-15 点击次数:1657次
  应用范围:
  
  该试剂盒在冰冻切片的免疫荧光染色中表现出的性能。
  
  产品优点:
  
  1、操作简单,重复性好;
  
  2、较传统方法能获得更高信噪比科研图片;
  
  3、节省抗体用量,比传统方法节约20%-40%抗体用量;
  
  4、节约科研时间,只需要30分钟,比传统方法实验速度提高约10倍;
  
  操作步骤:
  
  1、1、将组织浸泡入固定液中(TIF-1),4℃固定24小时。(对于那些需要进行灌注的动物:缓慢的用生理盐水灌注直到流出的生理盐水变澄清,然后快速的将组织取出进行固定操作)
  
  2、再将组织浸泡在组织孵育缓冲液中(TIF-2),4℃孵育48小时。
  
  3、将组织冰冻切片成10-20um的厚度,然后贴片到已经用多聚赖氨酸包被的载玻片上,置切片到-20℃或-80℃保存待用。
  
  4、在常温下,用试剂盒组分封闭液(TIF-3)将一抗和二抗稀释成一抗和二抗抗体工作液。
  
  5、在常温下,用试剂盒组分洗涤液A(TIF-4)孵育组织10min,然后用300ul洗涤液B(TIF-5)洗涤2次。
  
  6、用150ul一抗抗体工作液,4°C孵育组织过夜,然后用洗涤液B(TIF-5)洗涤组织3次,每次用300ul。
  
  7、用150ul二抗抗体工作液,常温下孵育组织10min,然后用洗涤液B(TIF-5)洗涤组织3次,每次用300ul。(二抗操作,需要避光,以减少荧光淬灭。)
  
  8、封片剂封片,待干后显微镜成像。
  
  

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